SerfullCare Benzonase核酸酶
货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 说明书 |
JH0015 | SerfullCare Benzonase核酸酶 | 100ul | 460 |
Benzonase核酸酶,是一种核酸内切酶,可将核酸降解成2~5个碱基的5‘单磷酸核苷酸,因其能高效降解任何形式(双链,单链,线状,环状)
的DNA和RNA而没有蛋白裂解活性,又被称为“全能核酸酶”。Benzonase核酸酶能有效降低蛋白样品粘度,去除蛋白样品中核酸的污染,且无
蛋白酶活性残留,核酸酶活性达1×106 U/mg蛋白。Benzonase核酸酶在降低粘性的同时, 也具有多种其他用途,如:减少了样品处理时间,增加
了蛋白产量,离心时时沉淀和上清分离的更彻底,更便于溶液的离心(尤其是超滤);提高色谱纯化的效率等
单 位 定 义
37℃,pH 8.0反应条件下,在30分钟内使△A260 值降低1.0(相当于完全消化37 μg DNA )的酶量定义为一个活性单位。
注意:含大量蛋白、细胞壁、其它盐分的粗制品,对该酶活性有部分抑制作用,使用时需要增加酶的用量。
应 用
蛋白提取时去除核酸污染:在重组蛋白纯化或组织细胞样品蛋白提取时,Benzonase核酸酶可有效降低样品粘度,利于下游操作
与细胞或细菌裂解液配合使用,去除粗提物中的核酸,降低溶液粘性,提高蛋白质产量
减少存放的外周血单细胞(PBMC)的结块现象
降解核酸,利于不可溶性蛋白复性前高质量包涵体制备
有效去除带负电荷的核酸对双向SDS-PAGE蛋白样品的影响,改善蛋白质的分离效果,增强2-DE分辨率
疫苗和病毒样品制备中DNA污染的去除
储 存
置于-20°C,可保存2年。
实 例 分 析
分别取不同量(0、0.125、0.25、0.5、1、5、10U)的Benzonase核酸酶消化人基因组DNA10min,进行琼脂糖电泳。
A为未加Benzonase处理的,B为加Benzonase处理的样品进行二维电泳。如图所示,Benzonase处理的样品可显著增加二维电泳的分辨率。
经RIPA裂解未经Benzonase核酸酶处理的样品,大量基因组DNA释放出来,呈鼻涕状。
离心后,左管为未加Bezonase核酸酶,有鼻涕状粘稠物质悬浮在管中,右管为加Bezonase核酸酶,上清为透明液体。
超 强 兼 容 性
全能核酸酶在非常广泛的条件下,都能保持很高的稳定性和消化核酸的活性,这使其能够与多种细胞裂解液,如RIPA,
或含有多种离子和非离子型去污剂、还原剂的蛋白提取试剂等兼容。例如:>100mM的盐酸胍会完全抑制Benzonase活性,
1mM的EDTA会部分抑制Benzonase活性,5mM的EDTA会使活性丧失90%,1mM的PMSF则不会抑制核酸酶活性。
浓度<0.4%的Triton® X-100对核酸酶活性几乎无影响,<0.4%的脱氧胆酸钠使核酸酶可保持70%的活性,
超过该临界值之后核酸酶活性会急剧降低,1%的浓度会使活性丧失70%;0.05%的SDS对核酸酶活性几乎无影响,
而SDS浓度在0.1%-1%之间时,核酸酶在变性后活性会急剧降低,可通过增加核酸酶的量使活性得到补偿。另外,
核酸酶可耐受6M尿素,当尿素达到7M时,核酸酶在变性后活性会急剧降低,亦可通过增加核酸酶的量使活性得到补偿
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